描述
 ATAC-seq(Assay for Transposase Accessible Chromatin with high-throughput sequencing,染色质易开放区域测序)是2013年由美国Stanford大学的William Greenleaf教授研发了一种全新的方法,利用DNA转座酶结合高通量测序技术,来研究染色体的可进入性。ATAC-seq的原理是,染色质易开放区域测序)利用Tn5转座酶切割染色质的开放区域,并加上测序引物进行高通量测序,通过生物信息分析鉴定转录因子结合位点和核小体区域位置,从而为研究基因调控、DNA 印记等提供有效的方法。通过研究特定状态下开放染色质,可以在DNA水平研究基因转录调控。
传统的寻找全基因组范围内开放的染色质区域采用的方式包括ATAC-seq、MNase-seq和DNase-seq,FAIRE-seq、chip-seq等。10x Genomics Chromium Single Cell ATAC Solution(10x scATAC-seq)是10x Genomics新推出单细胞表观基因组学水平上揭示染色质可接近性的研究策略。通过单细胞染色质可接近性图谱构建,不仅能清晰了解染色质结构,还可以绘制高分辨率转录因子调控网络,为深入了解疾病的诊断和治疗铺平道路。
技术优势
1. 稀有细胞高效捕:高效捕获稀有类型细胞,实现新突破;
2. 多种样本无挑剔:除常规活细胞悬液外,珍稀液氮速冻样本可实现细胞核水平研究;
3. 测序数据高保真:搭配DNBSEQ™测序系统,不怕单个细胞数据弄混;
4. 自主分析不求人:Dr. Tom交互式单细胞数据挖掘系统支持;
5. 服务模式一站达:流式分选服务服务助力目的细胞分选,一站式实现从组织到细胞数据获取及细胞群验证。
灵敏度细胞分选:高效捕获稀有细胞类型
将两种不同状态的人多功能干细胞(PPSCs以及NPSCs)以99:1的比例混合后,进行DNBelab C系列平台单细胞RNA文库制备和测序,最后鉴定到NPSCs细胞比例为1.3%,表明该平台具备可靠的罕见细胞捕获能力。
可检测单细胞转录调控区域中的开放染色质每个通道可容纳500-10000个细胞核,细胞核捕获率高达65%,运用10x官方软件和工具,可对单细胞基因调控网络进行精细化分析。
技术路线
描述
研究内容
单细胞多组学ATAC是10x Genomics推出的首个单细胞表观解决方案,可以同时获得同一细胞的基因表达和染色质可及性图谱,从而更好地分辨终末分化细胞和发育轨迹上的细胞类型,揭示调控元件、开放染色质和基因表达之间复杂的相互作用。
信息分析内容
1. 测序数据质控
2. 细胞鉴定
3. 细胞聚类
4. 插入片段统计
5. 靶向位点分析
6.文库复杂度分析
7. 数据可视化